實時熒光定量PCR可以用來精確測定DNA濃度嗎
實時熒光定量PCR不是用來測濃度的，可以用來做基因的拷貝數。但是如果妳的產物單壹，有相應的標準品，也是可以測濃度的，濃度的準確性和妳的標準曲線相關。
實時熒光定量PCR：實時熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的壹種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒遊標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時線上監控反應過程，結合相應的軟體可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
檢測指標是：各樣品的目的基因和管家基因分別進行Realtime PCR反應。PCR產物與 DNA Ladder在2%瓊脂糖凝膠電泳，GoldView染色，檢測PCR產物是否為單壹特異性擴增條帶。
精確測定DNA濃度的方法：
DNA純度和濃度的檢測:分光光度(紫外吸收)法
1.預熱紫外分光光度計10-20分鐘。
2.取所需的比色杯（4ml），其中壹只裝入3 mlH2O溶液，作為空白液，用來校正分光光度計零點及調整透光度至100。
3. DNA純度及濃度的測定：
①取3微升的DNA樣品加入比色杯，加dH2O至3000微升，混勻。
②將比色杯置入分光光度計中，調入射光波長，分別用空白溶液調整零點（T為100，OD為0），測待測樣品在260nm、280nm、230nm的OD值。
③計算濃度：
DNA濃度（ug/ml）=A260×50ug/ml×稀釋倍數
對於雙鏈DNA 1.0 OD260=50 ug/ml
對於單鏈RNA 1.0 OD260=40 ug/ml
4. 純的DNA溶液其OD260/OD280應為1.8，OD260/OD230應大於2.0。
⑴ OD260/OD280大於1.9時，說明有RNA汙染，小於1.6時表明有蛋白質或酚汙染。
不是用來測濃度的，可以用來做基因的拷貝數。測濃度最經典的還是紫外分光光度計，當然會有偏差，不過總體來說還是可以的。也可以用酶標儀。
實時熒光定量pcr就是qpcr嗎實時熒光定量PCR（qPCR）用什麽試劑盒比較好 加入熒遊標記探針，巧妙地把核算擴增、雜交、光譜分析和實時檢測技術結合在壹起，借助於熒光訊號來檢測PCR產物。壹方面提高了靈敏度，另壹方面還可以做到PCR每回圈壹次就收集壹個數據
實時熒光定量pcr與熒光定量pcr壹樣麽?這裏的實時是什麽意思是壹樣的，所謂的實時就是在儀器上可以隨時觀察pcr產物的擴增的情況。壹般也叫實時定量PCR
實時熒光定量PCR註意事項1. 按照正確的開關機順序操作，有助於延長儀器的使用壽命，減少儀器出故障的頻率。開機順序：先開電腦，待電腦完全啟動後再開啟定量PCR儀主機，等主機面板上的綠燈亮後即可開啟定量PCR的收集軟體，進行實驗。關機順序：確認實驗已經結束後，首先關閉訊號收集軟體，然後關掉定量PCR儀主機的電源，最後關閉電腦。
2. 應該定期備份您的實驗資料，備份頻率推薦每周壹次，用光碟燒錄。同時您也應該備份定量PCR儀的各種純熒光光譜校正檔案、背景檔案和安裝驗證實驗資料，這些檔案所在的目錄是C：/Appliedbiosystems/SDS Document。
3. 良好的實驗室環境有助於延長儀器的使用壽命，減少儀器出故障的頻率。推薦做到以下幾個方面：
電源：推薦配備合適的UPS或穩壓器。
通風：儀器的通風應該沒有阻擋。
溫度：推薦實驗室配備空調，溫度應該控制在10-30°C之間。
溼度：20-80%；對於潮溼的省份，推薦實驗室配備除溼機。
空間：易於操作，安全。
4. 怎樣判斷定量PCR儀的樣本加熱塊是否被汙染？怎樣清除汙染
壹個辦法是執行背景校正反應板，當壹個或多個反應孔連續顯示出不正常的高訊號，則表明該孔可能被熒光汙染物。另外壹種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下，執行ROI的校正，當某個孔的訊號明顯高出其他孔時，則表明該孔被汙染。
清除樣本加熱塊汙染的步驟如下：用移液器吸取少量乙醇並滴入每個汙染的反應孔中。 吹打數次。 將廢液吸入廢液杯中。重復以上步驟：乙醇三次，去離子水三次。確認反應孔中的殘留液體蒸發完。
biorad實時熒光定量pcr多少錢采用SYBR Green I 嵌合熒光法進行Real Time PCR 的專用試劑，用本制品進行Real Time qRT-PCR 可在同壹反應管內連續進行。反應過程中無需開啟管蓋新增試劑並可對擴增產物進行實時檢測，避免了汙染的同時提高了檢測靈敏度和實驗效率。非常適合於微量RNA 尤其是微量RNA病毒的檢測。本試劑盒包括最適合Real Time PCR的突變改造M-MuLV H Minus逆轉錄酶(TRUEscript RTase)、熱啟動HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制劑mix、同時包含適用於逆轉錄和PCR擴增的優化獨特反應體系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，與M-MuLV 相比，具有更強的延伸能力和穩定性。同時該酶提高了耐熱性，可以在42-50℃反轉錄，提高了復雜二級結構，GC含量豐富模板反轉錄效率。而采用優質熱啟動酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的減少PCR擴增全程中的非特異性擴增產物產生，大大提高了熒光定量PCR反應的精確性。本制品可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確定量檢測，重復性好，可信度高。
適用範圍：適用於高拷貝、低拷貝基因檢測；部分高GC含量或具有復雜二級結構的RNA模板。杭州昊鑫生物的，大概50次的900塊錢左右.
Thermo Scientific的PikoReal實時熒光定量PCR儀好用嗎還可以。Termo，Biored，羅氏的定量PCR儀都挺好用的，也屬於高階品牌。
實時熒光定量pcr結果2.83e+08對於乙肝病毒的DNA化驗來說，不能不算是高科技。但是所出的結果卻不能用來描述病情的程度。
這裏有兩個概念必需先說明。第壹是乙肝患者，乙肝是乙型肝炎的簡稱，關鍵詞是肝炎。而肝臟要是發炎了，病人壹定是會有不舒服的表現的。第二是乙肝病毒攜帶者，乙肝病毒攜帶者的肝臟並沒有發炎，也就是說與正常人壹樣，沒有什麽不舒服的表現。於是乙肝患者與乙肝病毒攜帶者的主要區別就是看肝臟是否發炎。請簡單的想壹下，肝臟沒有發炎不就是沒有病呀。所以只有乙肝患者需要治療，而乙肝病毒攜帶者由於不處於疾病狀態之下，再說了，對於乙肝病毒攜帶者來說，有許多人可能化驗DNA數值要比妳的結果高許多。可是由於肝臟並沒有發炎，所以不需要進行任何的治療。
實時熒光定量pcr結某1.83e十02壹般是代表每毫升樣品中有183個目的拷貝。但是這個數字是不準確的，已經在檢測限以下了