当前位置 - 股票行情交易網 - 財經新聞 - 人工制備抗體制備方法有哪些?

人工制備抗體制備方法有哪些?

抗體在疾病的診斷和免疫防治中的重要作用,使人們對抗體的需求越來越大。人工制備抗體是大量獲得抗體的重要途徑。早年人工制備抗體的方法主要是以相應抗原免疫動物,獲得抗血清。由於抗原常常含有多種不同的抗原表位,加之所獲得的抗血清也未經免疫純化,因此,獲得的抗血清實際上是含多種抗體的混合物,即多克隆抗體(polyclonal antibody)。用於制備抗血清的動物也因抗體需求量的增加而從小鼠、大鼠、兔、羊到馬等大動物。

為了獲得大量的、高特異性、均質的抗體,1975年,Kohler和Milstein建立了體外細胞融合技術,獲得了免疫小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞,大規模地制備出高特異性的單克隆抗體(monoclonal antibody,簡稱單抗)。此後,單抗在理論和實踐上的應用,成了解決生物學、醫學等諸多重大問題的重要手段。然而其中仍有問題有待解決,例如在體內應用時,作為異源蛋白的單抗會引起人抗小鼠抗體反應(human anti-mouse antibody response,HAMA)。隨著DNA操作和基因工程技術的發展,使得人們已有可能對抗體基因進行拆裝和改建,發展出種種適合不同需求的基因工程抗體及其改型抗體(reshapedantibody)。

人工制備抗體是獲得大量抗體的重要途徑。制備方法有按常規動物免疫方法獲得的多克隆抗體,用雜交瘤技術制備的單克隆抗體和近年來發展的基因工程抗體法。

壹、多克隆抗體

多克隆抗體是由含多種抗原表位的抗原物質,刺激、活化多個B細胞克隆所產生的針對多種不同抗原表位的抗體混合物。在體內,多克隆抗體是機體發揮特異性體液免疫效應的重要分子,在中和抗原、免疫調理、介導CDC、ADCC中起重要作用。在體外,多克隆抗體主要來源於動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群。其特點是來源廣泛、制備容易。但由於多克隆抗體是多種不同抗原表位特異性抗體的混合,因此,它不能針對某壹特定表位,特異性不高,常出現交叉反應;同時也不易大量制備,其應用受到限制。

二、單克隆抗體

制備特異性抗體的理想方法是獲得只針對單壹表位的B細胞克隆,並在體外擴增,使其分泌抗體。然而,漿細胞在體外的壽命較短,也很難培養。雜交瘤細胞和單抗技術克服了這壹缺點。單抗在結構和組成上高度均壹,抗原特異性及同種型壹致,易於體外大量制備和純化,因此,單抗具有純度高、特異性強、效價高、少或無血清交叉反應,制備成本低等特性,已廣泛應用於疾病的診斷、特異性抗原或蛋白的檢測和鑒定、疾病的被動免疫治療和生物導向藥物的制備等。

三、基因工程抗體技術

隨著DNA重組技術的發展,人們開始用基因工程的方法制備部分或全人源化的基因工程抗體(Genetic engineering antibody),如人-鼠嵌合抗體、改型抗體、雙特異性抗體、小分子抗體等。基因工程的研制和發展,為新壹代抗體的制備和應用展示了廣闊前景。

目前義翹神州致力於為科研機構和藥企提供從抗原合成到抗體開發、篩選評價和生產的壹站式定制抗體服務。