核糖核酸酶A的用途
核糖核酸酶A(RNase A) 來源:牛胰腺.RNase A是壹種被詳細研究和具有廣泛應用的核酸內切酶.RNase A 對RNA有水解作用,但對DNA則不起作用.RNase A在C端和U端殘基處專壹地催化RNA的核糖部分3'-與5' -磷酸二酯鍵的裂開,形成具有 2',3'-環磷酸衍生物寡聚核苷酸.如 pG-pG-pC-pA-pG 被切割產生pG-pG-pCp 和 A-pG.可以用來去除DNA制品中的汙染RNA.
RNase I是RNase A的另壹種叫法,核糖核酸酶(牛胰)/RNA酶/核糖核酸酶A(牛胰)/核糖核酸酶I /RNASE A/ RNase I/RNASE都是壹種東西.
主要用於生化研究,測定核酸的結構
· RNase 保護檢測
· 去除非特異結合的RNA
· 分析RNA 序列
· 水解蛋白樣品中的RNA
· 純化DNA
此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝.
(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區.
(2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985). 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯配可被RNA酶A識別並切割.利用含SP5或T7噬菌體啟動子的質粒,在體外合成與野生型DNA或RNA互補的32p標記RNA探針,然後與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火, 所產生的單堿基錯配可用RNA酶A切割,通過凝膠電泳分析切割產物的大小即可確定錯配的位置.在所有各種可能的單堿基錯配中,大約50%可用此法確定.