豬瘟藍耳這倆疫苗到底能壹起免嗎
1、試驗材料與方法
1.1試驗材料
1.1.1試驗動物 廣東某1600頭基礎母豬群規模豬場,每次隨機抽取100份血清樣品檢測。
1.1.2檢測試劑 豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒、藍耳病抗體檢測ELISA試劑盒(均為美國IDEXX公司產品)。
1.1.3主要試驗儀器微量加樣器;Elx800型酶標儀。
1.1.4試驗用疫苗 豬瘟弱毒疫苗(傳代細胞源);高致病性豬藍耳病弱毒疫苗(JXA1-R株)
1.2 試驗方法
藍耳與豬瘟疫苗采用普免的方式:3個月1次,壹年4次。全場公、母豬1月份、4月份、7月份和10月份的第壹周免疫豬瘟弱毒疫苗2頭份,全場公、母豬2月份、5月份、8月份和11月份的第壹周免疫藍耳弱毒疫苗JXA1-R株2頭份。小豬2周齡免疫藍耳弱毒苗1頭份,4周齡與9周齡分別免疫豬瘟疫苗1頭份與2頭份。本試驗從2012年的11月份首次全場免疫了藍耳弱毒疫苗後,2013年的1月份、4月份、 7月份和10月份的25號檢測藍耳與豬瘟抗體水平,對豬場內的30頭公豬全部進行采血檢測,經產母豬隨機抽取100頭進行檢測,7周齡與12周齡小豬隨機抽取50頭進行檢測。2013年該豬場重胎母豬出現流產比例達到8%,產出的胎兒中死胎比例達到12%,保育豬消瘦,咳嗽,死亡率達到15%。
1.3 ELISA試驗方法及判斷標準
ELISA試驗方法及判斷標準,參照IDEXX公司試劑盒的說明和標準執行。豬瘟抗體ELISA試驗成立條件是:陰性對照的平均OD450值>0.5,陽性對照的阻斷率>50%。判斷標準:阻斷率<40%為陰性;40%≤阻斷率≤50%為可疑值;阻斷率>50%為陽性值。藍耳抗體檢測(IDEXX)ELISA 的S/P比例:S/P< 0.4 陰性;0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 弱毒疫苗感染,產生抗體;S/P>2.5 野毒感染,產生抗體。
1.4統計學處理
試驗數據用SPSS13.0軟件進行統計學分析,將統計結果以“均數±標準差”表示,並進行方差分析和采用LSD法進行多重比較。
2 結果
2.1 從圖1可知,0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 為藍耳弱毒疫苗感染所產生的抗體;S/P>2.5為藍耳野毒感染所產生的抗體。公豬藍耳抗體陽性率達到94%,野毒感染比例達到63%;經產母豬藍耳抗體陽性率達到95%,野毒感染比例達到61%;7周齡與12周齡小豬藍耳抗體陽性率達到99%,野毒感染比例達到70%。由圖2可知,公豬藍耳抗體離散度為52%,抗體平均值為2.82;經產母豬藍耳抗體離散度為47%,抗體平均值為2.85;7周齡與12周齡小豬藍耳抗體離散度為43%,抗體平均值為2.99。結果表明,所有豬均藍耳野毒感染明顯,藍耳弱毒苗對該豬場的藍耳病不能起到保護作用。
2.2 由圖3可知,豬瘟抗體阻斷率>50%為陽性值。公豬豬瘟抗體陽性率達到44%;經產母豬豬瘟抗體陽性率達到52.7%;7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體陽性率達到57.5%。由圖4可知,公豬豬瘟抗體離散度為37%,抗體平均值為53.2%;經產母豬豬瘟抗體離散度為37%,抗體平均值為51.8%;7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體離散度為42.5%,抗體平均值為55.2%。結果表明,整個豬場的豬瘟抗體水平偏低,離散度不夠理想,對整個豬群的豬瘟保護率不高。
3、討論
豬藍耳病弱毒疫苗對豬瘟免疫抗體的影響通過對本試驗的結果分析發現高致病性豬藍耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫後藍耳野毒感染率高達64%,藍耳抗體S/P平均值均已超過2.5,表明該豬場藍耳病病毒較活躍,已經感染了藍耳野毒,說明該疫苗不能有效的控制藍耳病。豬瘟抗體陽性率平均值僅為77%,且抗體離散度平均值僅達到39%,2項指標均較差,說明豬瘟抗體不合格。因此,我們可以得知高致病性豬藍耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫對豬瘟細胞苗免疫產生明顯的幹擾或抑制作用。這與張鳳華等報道免疫豬藍耳病弱毒苗對豬瘟免疫效果產生明顯的幹擾作用基本壹致。這很有可能與藍耳病病毒的發病機理有較大關系,藍耳病病毒在復制時與肺泡巨噬細胞的受體結合,直接導致肺泡巨噬細胞的碎裂溶解,延緩了肺泡巨噬細胞對抗原處理和遞呈作用,從而導致宿主發生免疫調節紊亂。同時藍耳病病毒作用於免疫系統的T淋巴細胞,造成T淋巴細胞各亞群的比例下降,從而抑制了機體對其他病原體的免疫反應。同時藍耳病病毒還具有“抗體依賴性增強作用”,又對豬瘟弱毒疫苗的免疫抗體產生有抑制作用,由此可見藍耳病弱毒疫苗免疫是壹把雙刃劍,有利有弊。據杜喜忠等報道,2種疫苗免疫間隔時間7d,仍然有明顯幹擾作用。因此,豬場應結合自己的實際情況來決定是否免疫藍耳弱毒苗。在2013年的李曼世界養豬大會上,工程院院士楊漢春教授就明確指出我們應少用藍耳弱毒苗,更加不能使用不同毒株的藍耳弱毒苗(藍耳病病毒易發生變異重組),而應采用凈化的方式來控制藍耳病。現在這壹觀點已得到絕大多數專家、學者以及規模養豬場管理者的認可。