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如何評價色譜柱的選擇性和柱效

色譜柱的選擇性和柱效的評價如下:

對色譜柱的基礎要求是:柱效高、選擇性好,分析速度快等。目前市售的用於HPLC的各種色譜柱種類繁多,從色譜柱填料來分,可分為矽膠基質和有機雜化球基質的色譜柱,還有不同長短、不同微粒大小的色譜柱。

1、色譜柱的選擇

可根據待分析樣品的極性、分子量大小、是否可溶於水等因素來考慮。如樣品分子量大於2000的,可溶於水的,可選擇凝膠色譜柱、大孔徑反相色譜柱、大孔徑離子交換色譜柱。分子量小於2000的,溶於有機相的,可選擇正相模式色譜柱。溶於水,可電離的樣品可選擇反相模式色譜柱或離子交換或未經塗漬親水模式的色譜柱等。

2、色譜柱柱效

柱效受柱內外因素影響,為使色譜柱達到最佳效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結構及裝填技術。即使最好的裝填技術,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不壹樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應。在壹般的液相色譜系統中,柱外效應對柱效的影響遠遠大於管壁效應。