請問免疫組化如何正確選擇和使用二抗

1 種屬來源要匹配：根據所用壹抗選定二抗。壹般來說，如果壹抗是小鼠源性，二抗應選擇兔/山羊或其它種屬抗小鼠的抗體。目前，美國Vector公司和 Zymed公司都有開發的用小鼠抗體檢測小鼠組織的試劑盒，即壹抗來源於小鼠，該試劑盒采用了通用非特異性封閉液和專利封閉內源性小鼠Ig的封閉液，可以得到清晰的染色背景。

2.註意抗體同種型和亞型：確定壹抗同種型和亞型後，可以選擇抗壹抗來源種屬廣譜Ig或針對壹抗亞型的二抗。如壹抗是小鼠IgG1，可以選用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。

3.正確使用：也需要重新選擇稀釋比例。壹般供應商提供稀釋比例從1：10稀釋度始，作5倍比稀釋。