維生素與蛋白質食物怎麽用實驗檢驗
壹、實驗原理
維生素C又稱抗壞血酸，還原型抗壞血酸能還原染料2，6-二氯酚靛酚鈉鹽，本身則
氧化成脫氫抗壞血酸。
2，6-二氯酚靛酚的鈉鹽水溶液呈藍色，在酸性溶液中呈玫瑰紅色，當其被還原時就
變為無色，因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定樣品中的還原型抗壞血酸。當抗壞血酸完全被氧化後，稍多加壹點染料，使滴定液呈淡紅色，即為終點。如無其他雜質幹擾，樣品提取液所還原的標準染料量與樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。 二、試劑和器材
偏磷酸醋酸溶液：取15g（用時研細）溶於40mL醋酸及20mL水的混合液中，然後
用水稀釋至500mL，過濾後儲入試劑瓶中。
標準2，6-二氯酚靛酚溶液：取0.25g2，6-二氯酚靛酚溶於700mL蒸餾水中（用力攪
動），加入300mL磷酸緩沖液（預先配制9.078g/L KH2PO4-11.867g/L Na2HPO4·2H2O水溶液，用時以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4：6的比率將其混合，pH值為6.9-7.0），翌日過濾，濾液儲於棕色瓶中，臨用時，以抗壞血酸溶液標定。
標準維生素C溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解0.1g維生素C於100mL容量瓶中，
再以該液稀釋至刻度。
2，6-二氯酚靛酚液的標定：在3個100mL錐形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再
各加2mL標準維生素C溶液，搖勻。用上面所制的標準2，6-二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰紅色保持30s不褪色為止。記下所用2，6-二氯酚靛酚溶液體積平均值，再以同樣方法做壹空白實驗，取7mL偏磷酸醋酸液加水若幹毫升（相當於以上所用的2，6-二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。將第壹次滴定的量減去空白實驗的量，即為標準維生素的反應量，求出1mL 2，6-二氯酚靛酚對應於維生素C的質量（mg）。 研缽、容量瓶、剪刀、錐形瓶、微量滴定管 三、實驗步驟
1、用自來水沖洗果蔬樣品，再以蒸餾水清洗，用紗布或吸水紙吸幹表面水分，然後
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稱取25g，剪碎，在研缽中研呈漿狀。加入20mL 3%偏磷酸醋酸液，攪動，抽提。過濾液經漏鬥流入100mL容量瓶中，殘渣再以30mL偏磷酸醋酸液提取3次，濾液及洗滌液皆流入該容量瓶中，以蒸餾水稀釋至刻度，加塞搖勻。如濾液顏色較深，可用白陶土脫色。
2、吸取10mL提取液於錐形瓶中，加5mL偏磷酸醋酸液，混合均勻，以2，6-二氯
酚靛酚溶液滴定，並不斷搖動，至溶液呈玫瑰紅色保持30s不褪色為止。 3、吸取15mL偏磷酸醋酸液，加水若幹毫升（相當於以上樣品實驗滴定所用2，6-二氯酚靛酚溶液的量）做壹空白實驗，用同樣方法，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。 4、結果計算
維生素C的含量（mg/100g）按下式計算：
mcvv*100
10
100
**C21）（的含量維生素?
式中 v1——樣品用2，6-二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mL V2——空白用2，6-二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mL C——1 mL 2，6-二氯酚靛酚相當於維生素C的含量，mg/mL m——樣品質量。 四、註意事項
1、樣品中某些雜質也能還原2，6-二氯酚靛酚，但速率均較抗壞血酸慢，故終點以
淡色存在30s為準。
2、維生素C還可以用2%草酸溶液來提取，2%草酸和偏磷酸同樣具有抑制抗壞血酸
氧化酶的功效。
3、若樣品中含有大量Fe2+,可以還原2，6-二氯酚靛酚，用草酸為提取液，則Fe2+不
會很快與染料起作用。