如何正確繪制血清醋酸纖維薄膜電泳譜
1.實驗儀器方面應註意：
1.1電泳儀和電泳槽 北京六壹儀器廠生產的DYY-Ⅲ8A穩壓穩流定時電泳儀、電泳槽。每次試驗開始或結束要註意將電泳儀的各個調節樞紐調至零點位置，電泳槽要用水洗凈再用蒸餾水沖洗涼幹，保護鉑金絲，使之不被腐蝕。
1.2分析天平 上海天平儀器廠出產的TG328B分析天平。使用前進行調試，保證測定結果正確。
1.3分光光度儀 上海第三分析儀器廠制造的721分光光度計。使用前進行調試，保證稱量數量準確。
2.實驗藥品和載體方面應註意：
2.1實驗藥品 用於配制緩沖液及染色液所用的藥品，盡可能選擇正規廠家生產的藥品，試劑等級要求在AR或以上，而且要求配制緩沖液所需的巴比妥和巴比妥鈉，兩種藥品盡可能為同壹廠家生產，並註意有效期。
2.2載體 由於載體成分及做工不同，對血清蛋白吸附、分離等能力不同會造成電泳結果的差異[3]。因此，血清蛋白電泳所選用的載體-醋酸纖維素薄膜（我們選用浙江黃巖四青生化材料廠出品）的質量要求應該是質細、孔細、吸水性強、染料吸附量少、蛋白區帶分離鮮明、對蛋白染色穩定者為佳。
3.試驗準備時需註意：
3.1試劑準備 配制緩沖液的藥品（巴比妥緩沖液-巴比妥/巴比妥鈉，PH8.6、離子強度0.06）要求用分析天平稱量，最好精確到0.001g。配制的緩沖液離子強度偏小易導致區帶拖尾；若緩沖液離子強度偏大易導致區帶過密。配制染色液的藥品（氨基黑10B）也用分析天平稱量，最好精確到0.01g。其它試劑可按照常規配制。
3.2電泳儀和電泳槽準備及電極的連接
3.2.1電泳儀的準備 首先檢查電泳儀功能狀態，將各個調節樞紐調至零點位置，使指針復位。
3.2.2電泳槽準備的準備 首先要用水洗凈電泳槽，再用蒸餾水沖洗電泳槽後涼幹，把洗凈並折疊好的四層幹沙布放在裝有緩沖液的玻璃槽中浸泡，再置於電泳槽中的支架上搭橋，然後向兩邊的電泳槽中加入等體積的緩沖液至刻度線水平。
3.2.3電極的連接 最初兩次電泳可按照“正常連接方式”將電泳儀上的電極連接於電泳槽的電極上。如果連續多次電泳則需要“調換電極連接方式”才能獲得理想的電泳效果，否則要求更換電泳槽中的緩沖液。
4.學生操作時必須註意：
實驗過程中正確指導學生操作是做好本試驗的主要環節，必須加強對學生在準備、點樣、電泳、通電、染色和漂洗、定量等步驟的指導，持別是在“點樣”這壹步驟。
4.1準備 將醋酸纖維素薄膜切割成2×8cm的矩形小孩子條，在其粗糙面的壹端1.5cm處，用鉛筆輕劃壹橫線作為“加樣位置”的記號，可以按照每位同學的學號進行編號，然後置於裝有緩沖液的玻璃槽中浸泡並不斷搖動5～10分鐘，待薄膜充分浸透後，即膜條無白斑時，用攝子取出，夾於潔凈的濾紙中間吸去多余的緩沖液。註意不能吸得太幹以避免影響導電，點樣薄膜過幹，導致電泳圖譜有條痕，亦不能留存過多緩沖液以避免點樣時血清隨著緩沖液而擴散開來。
4.2點樣 掌握好點樣技術是獲得清晰電泳圖譜的最重要環節。先取少量血清置於玻璃板上，用點樣器（蓋鋁片制作）的鋼口蘸取血清，然後將鋼口平值“印”於點樣線上（不可用力過大以避免弄破薄膜），待血清滲入薄膜後移開點樣器。註意觀查血清是否均勻地分布在點樣線上，若有血清擴散或血清分布不均勻則廢棄，重新選用另外壹張準備好（指已浸泡透）的備用薄膜點樣。
必須註意的是：點樣時血清分布不均勻易導致電泳圖譜不齊；點樣時血清加樣量過多易導致電泳圖譜分離不良或中間顏色變淺；點樣時血清加樣量過少可導致電泳圖譜染色過淺。這些因素會影響蛋白電泳的結果分析。因此，在實驗操作時應指導學生掌握好加樣量，以避免造成定量測定時產生結果誤差。
4.3電泳 將已點樣的薄膜端靠近陰極，粗糙面（即點樣面）向下（防蒸幹影響導電）平整地緊貼於電泳槽支架的“沙布橋”上。蓋上蓋子，平衡5分鐘後通電。註意，電泳槽密閉不嚴，薄膜易蒸幹，導致電泳圖譜有條痕。
4.4通電 壹般用電壓130～160Ⅴ，若用電流則按照0.4～0.6毫安/厘米進
行換算。夏季通電40～50分鐘，冬季通電60分鐘左右。待電泳區帶展開約3.5厘米時，將調節樞紐調至零點位置，然後切斷電源。如出現電滲現象可增大電流量克服。但是，電流過大易導致電泳圖譜有條痕。
4.5染色漂洗 小心從電泳槽中取出薄膜，直接浸於裝置染色液的玻璃槽中，並輕輕不斷搖動5分鐘，待能看清楚藍色的電泳區帶後，取出並用漂洗液連續漂洗，直至薄膜底色漂凈為止。即得五條蛋白色帶。從遠離點樣端起依次為清蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白。應註意的是染色時間不足夠易導致染色後清蛋白中間顏色變淺。
4.6定量 將漂凈的薄膜用濾紙吸幹，由蛋白質區帶分段剪下，分別浸入裝有0.4mol/LnaOH溶液的試管中，清蛋白管用4ml，其余各管為2ml。振搖數次，約25分鐘，藍色即可完全浸出。用721分光光度計於580～620nm波長進行比色，蒸餾水調零，讀取各管吸光度數，計算出白蛋白和各種球蛋白所占百分比。
4.7透明 如果需要保存電泳結果，可按照下列方法將薄膜透明：將染色、漂洗、幹燥後(可用幹燥箱幹燥)的醋酸纖維素薄膜電泳圖譜置於透明液中浸泡1～3分鐘後取出，貼於玻璃板上，不要存在氣泡。約2～3分鐘薄膜便可完全透明，待幹後撕下壓平整，可供長期保存和直接用於光密度計掃描分析。