氣相色譜儀的使用方法,及使用註意事項?應用範圍?
進樣應註意問題
手不要拿註射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡(吸樣時要慢、快速排出再慢吸,反復幾次,10ul註射器金屬針頭部分體積0.6ul,有氣泡也看不到,多吸1-2ul把註射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動針桿排除氣泡,(指10μl註射器,帶芯子註射器平感覺)進樣速度要快(但不易特快),每次進樣保持相同速度,針尖到汽化室中部開始註射樣品。
安裝色譜柱
1.安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。
2.填充柱有卡套密封和墊片密封,卡套分三種,金屬卡套,塑料卡套,石墨卡套,安裝時不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片(島津色譜是墊片密封)。
3.色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測器中。
4. 毛細管色譜柱 安裝插入的長度要根據儀器的說明書而定,不同的色譜汽化室結構不同,所以插進的長度也不同。需要說明的如果妳用 毛細管色譜柱 采用不分流,汽化室采用填充柱接口這時與汽化室連接毛細管柱不能探進太多,略超出卡套即可。
氫氣和空氣的比例對FID檢測器的影響
氫氣和空氣的比例應1:10,當氫氣比例過大時FID檢測器的靈敏度急劇下降,在使用色譜時別的條件不變的情況下,靈敏度下降要檢查壹下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有壹種氣體不足點火時發出“砰”的壹聲,隨後就滅火,壹般當妳點火電著就滅,再點還著隨後又滅是氫氣量不足。
使用TCD檢測器
1.氫氣做載氣時尾氣壹定要排到室外。
2.氮氣做載氣橋流不能設大,比用氫氣時要小的多。
3.沒通載氣不能給橋流,橋流要在儀器溫度穩定後開始做樣前在給。
如何判斷FID檢測器是否點著火
不同的儀器判斷方法不同,有基流顯示的看基流大小,沒有基流顯示的用帶拋光面的扳手湊近檢測器出口,觀察其表面有無水汽凝結 。
如何判斷進樣口密封墊是否該換
進樣時感覺特別容易,用TCD檢測器不進樣時記錄儀上有規則小峰出現,說明密封墊漏氣該更換。更換密封墊不要擰的太緊,壹般更換時都是在常溫,溫度升高後會更緊,密封墊擰的太緊會造成進樣困難,常常會把註射器針頭弄彎。
如何選擇合適的密封墊
密封墊分壹般密封墊和耐高溫密封墊,汽化室溫度超過300℃時用耐高溫密封墊,耐高溫密封墊的壹面有壹層膜,使用時帶膜的面朝下。
怎樣防止進樣針不彎
很多做色譜分析工作的新手常常會把註射器的針頭和註射器桿弄彎,原因是:
1.進樣口擰的太緊,室溫下擰的太緊當汽化室溫度升高時矽膠密封墊膨脹後會更緊,這時註射器很難紮進去。
2.位置找不好針紮在進樣口金屬部位。
3.註射器桿彎是進樣時用力太猛,進口色譜帶壹個進樣器架,用進樣器架進樣就不會把註射器桿弄彎。
4.因為註射器內壁有汙染,註射時將針桿推彎。註射器用壹段時間就會發現針管內靠近頂部有壹小段黑的東西,這時吸樣註射感到吃力。清洗方法將針桿拔出,註入壹點水,將針桿插到有汙染的位置反復推拉,壹次不行再註入水直到將汙染物弄掉,這時妳會看到註射器內的水變的渾濁,將針桿拔出用濾紙擦壹下,再用酒精洗幾次。分析的樣品為溶劑溶解的固體樣時,進完樣要及時用溶劑洗註射器。
5.進樣時壹定要穩重,急於求快會把註射器弄彎的,只要妳進樣熟練了自然就快了。
提高分離度的幾種方法
1.增加柱長可以增加分離度.
2.減少進樣量(固體樣品加大溶劑量).
3.提高進樣技術防止造成兩次進樣.
4.降低載氣流速.
5.降低色譜柱溫度.
6.提高汽化室溫度.
7.減少系統的死體積,主要是色譜柱連接要插到位,不分流進樣要選擇不分流結構汽化室。
8. 毛細管色譜柱 要分流,選擇合適的分流比.
綜上所訴要根據具體情況在實驗中摸索,比如降低載氣流速、降低色譜柱溫度又會使色譜峰變寬,因此要看色譜峰型來改變條件。最終目的是達到分離好,出峰時間快。
氣相色譜 柱的安裝
色譜柱的正確安裝才能保證發揮其最佳的性能和延長使用壽命。 正確的安裝請參考以下步驟:
步驟1. 檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等檢查氣體過濾器和進樣墊,保證輔助氣和檢測器的用氣暢通有效。如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需要將進樣口的襯管清洗或更換。
步驟2. 將螺母和密封墊裝在色譜柱上,並將色譜柱兩端要小心切平
步驟3. 將色譜柱連接於進樣口上色譜柱在進樣口中插入深度根據所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能最大可能地保證試驗結果的重現性。通常來說,色譜柱的入口應保持在進樣口的中下部,當進樣針穿過隔墊完全插入進樣口後如果針尖與色譜柱入口相差1-2cm,這就是較為理想的狀態。(具體的插入程度和方法參見所使用GC的隨機手冊)避免用力彎曲擠壓毛細管柱,並小心不要讓標記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細柱接觸摩擦,以防柱身斷裂受損。將色譜柱正確插入進樣口後,用手把連接螺母擰上,擰緊後(用手擰不動了)用扳手再多擰1/4-1/2圈,保證安裝的密封程度。因為不緊密的安裝,不僅會引起裝置的泄漏,而且有可能對色譜柱造成永久損壞。
步驟4. 接通載氣當色譜柱與進樣口接好後,通載氣, 調節柱前壓以得到合適的載氣流速(見下表)。
柱前壓設置為Psi
15m 25m 30m 50m 100m
0.20mm 10-15 20-30 18-30 40-60 80-120
0.25mm 8-12 13-22 15-25 28-45 55-90
0.32mm 5-10 8-15 10-20 16-30 32-60
0.53mm 1-2 2-3 2-4 4-8 6-14
(以上僅為建議的起始設置,具體數值要依據實際的載氣流速。)將色譜柱的出口端插入裝有己烷的樣品瓶中,正常情況下,我們可以看見瓶中穩定持續的氣泡。如果沒有氣泡,就要重新檢查壹下載氣裝置和流量控制器等是否正確設置,並檢查壹下整個氣路有無泄漏。等所有問題解決後,將色譜柱出口從瓶中取出,保證柱端口無溶劑殘留,再進行下壹步的安裝。
步驟5. 將色譜柱連接於檢測器上其安裝和所需註意的事項與色譜柱與進樣口連接大致相同。如果在應用中系統所使用的是ECD或NPD等,那麽在老化色譜柱時,應該將柱子與檢測器斷開,這樣檢測器可能會更快達到穩定。
步驟6. 確定載氣流量,再對色譜柱的安裝進行檢查註意:如果不通入載氣就對色譜柱進行加熱,會快速且永久性的損壞色譜柱。
步驟7. 色譜柱的老化色譜柱安裝和系統檢漏工作完成後,就可以對色譜柱進行老化了。
對色譜柱升至壹恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至高於最高使用溫度10-20℃左右,但是壹定不能超過色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。當到達老化溫度後,記錄並觀察基線。初始階段基線應持續上升,在到達老化溫度後5-10分鐘開始下降,並且會持續30-90分鐘。當到達壹個固定的值後就會穩定下來。如果在2-3小時後基線仍無法穩定或在15-20分鐘後仍無明顯的下降趨勢,那麽有可能系統裝置有泄漏或者汙染。遇到這樣的情況,應立即將柱溫降到40℃以下,盡快的檢查系統並解決相關的問題。如果還是繼續的老化,不僅對色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩定的基線。
壹般來說,塗有極性固定相和較厚塗層的色譜柱老化時間長,而弱極性固定相和較薄塗層的色譜柱所需時間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同。PLOT柱的老化步驟:HLZ Pora 系列 250℃, 8小時以上Molesieve(分子篩) 300℃ 12小時Alumina(氧化鋁) 200℃ 8小時以上由於水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附,使得這兩種色譜柱容易發生保留行為漂移。
當柱子分離過含有高水分樣品後,需要將色譜柱重新老化,以除去固定相中吸附的水分。
步驟8. 設置確認載氣流速對於 毛細管色譜柱 ,載氣的種類首選高純度氮氣或氫氣。載氣的純度最好大於99.995%,而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是 毛細管色譜柱 ,那麽依照載氣的平均線速度(cm/sec),而不是利用載氣流量(ml/min)來對載氣做出評價。因為柱效的計算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值:氮氣:10-12cm/sec 氫氣:20-25cm/sec載氣雜質過濾器在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長色譜柱壽命,而且很大程度的降低了背景噪音。建議最好安裝壹個高容量脫氧管和壹個載氣凈化器。使用ECD系統時,最好能在其輔助氣路中也安裝壹個脫氧管。
步驟9. 柱流失檢測在色譜柱老化過程結束後,利用程序升溫作壹次空白試驗(不進樣)。壹般是以10℃/min從50℃升至最高使用溫度,達到最高使用溫度後保持10min。這樣我們就會的到壹張流失圖。這些數值可能對今後作對比試驗和實驗問題的解決有幫助。在空白試驗的色譜圖中,不應該有色譜峰出現。如果出現了色譜峰,通常可能是從進樣口帶來的汙染物。如果在正常的使用狀態下,色譜柱的性能開始下降,基線的信號值會增高。另外,如果在很低的溫度下,基線信號值明顯的大於初始值,那麽有可能是色譜柱和 GC系統有汙染。其他:色譜柱的保存用進樣墊將色譜柱的兩端封住,並放回原包裝。在安裝時要將色譜柱的兩端截去壹部分,保證沒有進樣墊的碎屑殘留於柱中。
註意:當空氣中氫氣的含量在4-10%時,就有爆炸的危險。所以壹定要保證實驗室有良好的通風系統。
還可以用在海關檢驗檢疫,化育賽事的興奮劑檢測,及總裁部門,科研單位,大學院校等