兩種酶的反應緩沖液不壹樣，做雙酶切時如何處理？

如果是分開酶切的話，第壹個酶切完成後要回收（可用醇回收，效率比較高）後，再進行第二次酶切。

做轉化的時候，進行酶連接反應時，註意保持低溫狀態，因為LIGASE酶很容易降解。為保險起見，壹般連接3小時，16度；對含有AMP-RESISTENCE的質粒鋪板時，註意加AMP時的溫度，溫度過高，會使克隆株無法篩選出來。

擴展資料：

由於內切酶在非最佳緩沖液條件下的切割速率會減緩，因此使用時可根據每種酶在非最優緩沖液中的具體活性相應調整酶量和反應時間。

在大多數情況下，采用標準緩沖液的酶也能在這些特殊緩沖液中進行酶切。這保證了對緩沖液有特殊要求的酶也能良好工作。

由於內切酶在非最佳緩沖液中進行酶切反應時，反應速度會減緩，因此需要增加酶量或延長反應時間。

百度百科--雙酶切

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