ifcc根據實驗方法的
ifcc根據實驗方法的介紹如下:
乳酸脫氫酶測定試劑盒(IFCC法),壹種用於日立制全自動生化分析儀體外定量測定血清或血漿中的乳酸脫氫酶的化學產品。
產品性能結構及組成:
1、底物緩沖液:L-乳酸,防腐劑:疊氮化鈉;
2、NAD溶液:氧化型β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。
介紹
乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LD或LDH,EC1.1.1.27)是壹類NAD依賴性激酶,有LDHA、LDHB、LDHC三種亞基,可構成6種四聚體同工酶。
動物乳酸脫氫酶是由4個亞單位組成的四聚體,常見的A、B兩種亞基構成的5種LDH同工酶(LDH1-5),C亞基則僅組成壹種LDH同工酶即LDH-C4。
乳酸脫氫酶測定如下:
在酶的生產和應用過程中,經常要進行酶的活力測定,以確定酶量的多少及其變化情況。酶活力測定方法多種多樣,總的要求是快速、簡便、準確。酶活力的測定均包括兩個階段,首先要在壹定的條件下,酶與底物反應壹段時間,然後再測定反應液中底物或產物變化的量。
乳酸脫氫酶測定方法很多,根據酶作用的反應可分為二大類壹類利用順向反應以乳酸為基質另壹類利用逆向反應,以丙酮酸為基質。根據測定方法不同又可分為可見分光光度法和紫外分光光度法。
可見分光光度法利用2,4壹二硝基苯麟和丙酮酸作用,生成丙酮酸二硝基苯蹤,在堿性溶液中呈棕色,在520nm處光吸收峰最高。取試管加入0.5mol/l乳酸鈉溶液0.5ml,酶液0.1ml,空白管加蒸餾水,37℃水浴保溫3min。
然後測試管中加入NADH1mmol/l0.1ml,37℃水浴保溫15mn。加入2,4-,二硝基苯肼,37℃水浴保溫15min,加入氫氧化鈉溶液終止反應,靜置顯色而後處比色,通過標準曲線計算酶活。酶活單位規定:1min催化乳酸生成丙酮酸的酶量為個酶活力單位(U)。