TE緩沖液的配制方法
配制方法:量取下列溶液於500ml燒杯中
1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml
0.5M EDTA PH=8.0 1ml
向燒杯中加入約400mldd H2O均勻混合;將溶液定容到500ml後,高溫高壓滅菌;室溫保存.
1×TE Buffer
組成濃度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0
配制量:500ml
擴展資料
TE緩沖溶液(Tris-EDTA buffer solution)
在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效。如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大,會使酶活性下降甚至完全失活。所以我們要學會配制緩沖溶液。
由弱酸及其鹽組合壹起使具有緩沖作用。生化實驗室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統,在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因為有時影響實驗結果的因素並不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的反應。
硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。
檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。
磷酸鹽:在有些實驗,它是酶的抑止劑或甚至是壹個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沈澱出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。
三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬壹起作用,但在有些系統中也起抑止的作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris壹緩沖液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配制的緩沖液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,緩沖能力差。
參考資料: