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北蟲草母種的擴大培養如何操作?

由於母種數量壹般較少,不能滿足栽培需要。必須對其轉管擴大。擴繁用的培養基可同綜合馬鈴薯、葡萄糖瓊脂(簡稱綜合PDA培養基)。也可用以下配方培養基。比較簡單的如:蔗糖10克、蛋白腖10克,硫酸鎂0.5克,維生素B5片,瓊脂15克,水1000毫升。或者用蔗糖30克,天門冬酰胺1克,硫酸鐵0.3克,磷酸二氫鉀1.25克,氯化鉀0.5克,硫酸鐵0.01克,瓊脂15克,蒸餾水1000毫升。經高壓滅菌後備用。

轉管接種是培養真菌類藥材的壹個最基本的操作,需在無菌室或相對清潔的環境進行,有無菌室,可在接種前打開紫外光燈1小時,關閉後半小時可供使用。培養基及操作用具事先放入無菌室,母種可由接種者帶入,進入接種室前先洗手,換上幹凈的,最好是經過滅菌的衣服、帽子,穿上無菌間專用鞋,進去後中途最好不要出來。無菌室的門不要再打開,全部工作完畢再開,避免外部雜菌進入。

接種用的接種針、鑷子等可插入盛酒精的廣口瓶中備用。工作人員用75%酒精棉球擦手及擦菌種試管外壁。點燃酒精燈,左手並排拿母種管及待接的斜面試管,斜面向上,便於觀看,先用右手輕輕松動棉塞。再用右手拿接種針,在酒精燈上灼燒片刻,針尖要燒紅,其他凡進入試管部分也都要燒壹燒滅菌。然後用右手小指及小指與無名指間分別夾著兩個棉塞,輕輕撥出,左手把兩個試管口在火焰上燒壹下。再把接種針在火焰上燒過,伸入待接種試管斜面上使它冷卻,然後伸入原母種管內,勾出少許白色菌絲體(米粒大),放到待接種試管內,放在斜面的中心部位,以利其菌絲向周圍生長延伸。然後將棉塞塞上。這樣就完成了第壹管的接種程序,接種動作要迅速,接第二管時接種針必須重新在火焰上燒過再用。接完後貼上標簽,寫上菌名,接種日期等,壹般壹支母種可轉接20支以上甚至40支新斜面。可將其7~10支為壹紮,用牛皮紙包好放入20~25℃進行培養,10~14天菌絲長滿斜面,即成二級母種。可將它作為純菌種保存。更可以用它來生產栽培種。