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基因擴增實驗室緩沖間要有什麽設施

1、主體結構:

目前實驗室主體彩鋼板、鋁合金型材室內所陰角、陽角均采用鋁合金R50內圓角鋁解決容易汙染、積塵、易清掃等問題並且彩鋼板結構牢固線條簡明美觀密封性

2、標準四區隔氣壓調節:

PCR程試劑準備、標本制備PCR擴增區及產物析檢測區四獨立實驗區整區域整體緩沖走廊每獨立實驗區設置緩沖區同各區通氣壓調節使整PCR實驗程試劑標本免受氣溶膠汙染並降低擴增產物員環境汙染

3、消毒:

四實驗區四緩沖區頂部及傳送窗內部安裝紫外燈供消毒用

試劑準備區標本制備區設置移紫外線燈實驗桌進行局部消毒

4、機械連鎖銹鋼傳遞窗:

試劑標本通機械連鎖銹鋼(建議使用電連鎖式)傳遞窗傳遞保證試劑標本傳遞程受汙染(物流)

5、面

面建議使用PVC卷材面或自流坪面整體性便於進行清掃耐腐蝕沒條件采用水磨石面或塊瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要於2mm

6、照明

燈具要選用凈化燈具能達便於清洗、積塵特點

另外:

PCR實驗室兩功能工作區域:核酸擴增前區核酸擴增區核算擴增前區包括試劑準備間本制備間兩房間各自獨立能現空氣互通兩房間相外界氣壓呈壓狀態核酸擴增區包括擴增區產物析區使用實熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀PCR實驗室兩區域合並房間區域兩房間兩房間必須各自獨立能現空氣互通核算擴增區外界氣壓呈負壓狀態

PCR實驗室根據使用儀器功能合理設置各工作區域采用聚合酶聯反應:則設置試劑儲存準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物析區四單獨工作區域用區式品需要粉碎處理需增設品粉碎區;若使用實熒光PCR:基擴增區、基產物析區合並房間內;采用標本處理、核酸提取及擴增檢測體全自化PCR析儀則標本制備區、擴增區、擴增產物析區合並區域PCR實驗室原則設置五區或四區或三區或二單獨工作區

核酸擴增前區核酸擴增區設房間內必須滿足列要求前提:

核酸擴增前區實驗室內設置兩同位置實驗區試劑配置超凈工作臺操作品處理物安全櫃內操作

核酸擴增區使用全封閉擴增檢測系統實熒光PCR儀等

每實驗員使用各自試劑、耗材、移液器盛放汙染物盛器

實驗前操作區域***享器具進行清潔及消毒

各區域試劑、器具、儀器設備該區專用交叉使用

三、空氣流與壓差要求

PCR實驗室空氣流向必須嚴格按照試劑儲存準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物析區空氣壓力逐漸遞減式進行防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前區域風速流向混亂

保證房間內壓差避免汙染應空調面板處寫清楚送風機排風機啟順序關閉順序先順序混亂

空氣潔凈級別同相鄰房間間靜壓差應於5帕潔凈室(區)與室外氣靜壓差應於10帕應配備監測靜壓差設備並定期監控

般情況試劑配制室及品處理室宜呈微壓防外界含核酸氣溶膠空氣進入造汙染;通控制進風風量於排風風量達壓效

核酸擴增室及產物析室應呈微負壓防含核酸氣溶膠擴散汙染試劑與品通控制排風風量於進風風量達負壓效

理想情況PCR實驗室緩沖間內設置壓使室內空氣流向室外室外空氣流向室內 PCR實驗室進風由原央空調控制要求央空調風口安裝指定定點

四、實驗室面積及設備間距

般說各房間面積沒嚴格要求需能放置所需儀器設備並且便於員操作即物安全櫃房間面積能於10平米並且每增加臺物安全櫃房間要增加10平米

各實驗室緩沖間面積般1300*(1300或1500)mm宜並且緩沖間面積能於實驗室房間面積1/8

做平面設計候首先要考慮素安全實驗室易發爆炸、火災、毒氣泄露等場所我做平面設計候應盡量要保持實驗室通風流暢、逃通道暢通根據際體工程標準我做劃供參照:

實驗臺與實驗臺通道劃標準(通道間隔用L表示)

L>500mm邊站操作;

L>800mm邊坐操作;

L>1200mm邊坐邊站間;

L>1500mm兩邊坐間;

L>1800mm兩邊坐間儀器

平臺、儀器臺宜離墻太近離墻400mm宜工作發危險易於疏散實驗臺間道應全部通向走廊另:實驗室建築層高宜3.7米-4.0米宜凈高宜2.7米-2.8米潔凈度、壓力梯度、恒溫恒濕等特殊要求實驗室凈高宜2.5米-2.7米(包括吊頂);實驗室走廊凈寬宜2.5米-3.0米.普通實驗室雙門寬1.1米-1.5米(稱門)宜,單門寬0.8米-0.9米宜

五、潔凈裝修要求

潔凈室(區)內表面應平整光滑、裂縫、接口嚴密、顆粒物脫落並能耐受清洗消毒墻壁與面交界處宜弧形或采取其措施減少灰塵積聚便於清潔

潔凈室(區)內各種管道、燈具、風口及其公用設施設計安裝應考慮使用避免現易清潔部位

潔凈室(區)窗戶、棚及進入室內管道、風口、燈具與墻壁或棚連接部位均應密封

六、工作服要求

凈化車間內工作員應穿著符合要求工作服工作服選材、式及穿戴式應與產操作空氣潔凈度級別要求相適應並混用潔凈工作服質應光滑、產靜電、脫落纖維顆粒性物質菌工作服必須包蓋全部毛發、胡須及腳部並能阻留體脫落物同空氣潔凈度級別使用工作服應別清洗、整理必要消毒或滅菌工作服洗滌、滅菌應帶入附加顆粒物質工作服應制定清洗周期

進入各區域必須嚴格按照單向進行同工作區域使用同工作服(例同顏色)工作員離工作服帶

實驗室應建立、執行員進潔凈區清潔程序管理制度員清潔程序合理

七、流路徑與物流路徑

進入實驗室區域工作員應該按照路徑:

公***清潔區——更衣間(更換潔凈服)——緩沖間——汙染實驗區

工作員退實驗室路徑:

汙染試驗區——緩沖間——淋浴間(條件設置)——更衣間——公***清潔區

所物品進入實驗區必須經雙扉互鎖傳遞窗利用傳遞窗消毒才進入實驗室內所物品必須經傳遞窗才傳遞實驗室外清潔公***區

八、門啟向

實驗室建築層高宜3.7米-4.0米宜PCR實驗室凈高宜2.5米-2.7米(包括吊頂);實驗室走廊凈寬宜2.5米-3.0米.普通實驗室雙門寬1.1米-1.5米(稱門)宜,單門寬0.8米-0.9米宜

般實驗室門主要向危險房間房門應朝外房門材質選擇壓力玻璃

壓差梯度房間門啟向應朝向壓向側啟;

考慮消防安全於些主要逃門啟向應朝向清潔區向啟

九、基本儀器設備考慮

(1)試劑貯存準備區

該實驗區主要進行操作貯存試劑制備、試劑裝主反應混合液制備試劑用於品制作材料應直接運送至該區經其區域試劑原材料必須貯存本區內並本區內制備所需貯存試劑與氣流壓力控制本區應外界保持微壓

試劑準備區儀器設備主要應加器、冰箱、平、低速離機、混勻器、移紫外燈等使用超凈工作臺作試劑配制操作臺面

(2)標本制備區

該區域主要進行操作本保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管測定DNA合本區壓力梯度要求:相於鄰近區域壓避免鄰近區進入本區氣溶膠汙染另外由於加操作能發氣溶膠所致汙染所應避免本區內必要走

標本制備區儀器設備主要應物安全櫃(B2避免提取核酸櫃內反復循環造標本間交叉汙染現假陽性結外應配備加器、臺式高速離機(冷凍及溫)、臺式低速離機、恒溫設備(水浴/或幹浴儀)、冰箱、混勻器移紫外燈等

(3)擴增擴增產物析區

該區域主要進行操作DNA擴增擴增片段測定外已制備DNA模板(自本制備區)加入主反應混合液(自試劑貯存制備區)制備反應混合液等本區內進行本區壓力梯度要求:相於鄰近區域負壓避免氣溶膠本區漏避免氣溶膠所致汙染應盡量減少本區內必要走別操作加等應超凈臺內進行

擴增區主要儀器核酸擴增熱循環儀(PCR儀實熒光或普通)熱循環儀電源應專用並配備穩壓電源或UPS防止由於電壓波擴增測定影響外根據工作需要配備加器、超凈臺等

產物析區:本區所使用儀器設備能加器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀洗板機等