什麽是基因敲除？
說到基因敲除，先要了解CRISPR/Cas基因編輯系統
CRISPR/Cas（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas）系統是目前被廣泛運用的基因編輯系統，其原理是由CRISPR轉錄產生的gRNA介導Cas核酸酶靶向目標序列，對序列進行切割。
CRISPR/Cas9基因編輯示意圖
(圖源：Wellcome Trust Sanger Institute,Sanger)
然後我們再來看看您問的CRISPR/Cas基因敲除
CRISPR/Cas9系統中sgRNA(smallguideRNA)識別並結合目標基因的靶向序列，引導Cas9對結合位點進行剪切，產生DNA雙鏈斷裂（double-strandbreak,DSB），機體自身通過非同源重組（non-homologousendjoining，NHEJ）的方式修復DSB，參與修復的蛋白經常會在DNA末端插入或刪除幾個堿基，修復後的基因由於產生突變而導致功能喪失，從而實現機體內的基因敲除。
最後再來看看如何應用
應用：基因敲除細胞系建立、基因敲除建立動物疾病模型。
技術優勢：相較於在mRNA水平“敲低”目的基因的RNAi而言，CRISPR/Cas9系統造成基因序列的缺失，從而能完全沈默（即敲除）目的基因。
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