凝膠柱層析操作方法?
凝膠柱層析的使用方法大體有壹下步驟:
(1)預處理稱取葡聚糖凝膠(有不同型號)若幹克,加入洗脫劑(通常為甲醇或者水,這裏以甲醇為例)約20倍凝膠量,置室溫下3h進行溶脹,溶脹必須徹底,否則會使上柱後流速變慢,凝膠斷裂等。
(2)裝柱凝膠層析柱的直徑與柱長之比壹般為1:15
(3)加樣裝好的色譜柱至少要用相當於3倍保留體積的洗脫劑平衡。
(4)洗脫與收集洗脫時,用甲醇作洗脫劑,並且要連續不斷地進行,使凝膠柱上端保持壹定的液層,防止凝膠柱表面的液體流幹。