簡述tbst與pbst的區別及配置
TBST是TBS+Tween的縮寫,生物實驗中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20。那麽tbst與pbst都有上面區別呢?
tbst與pbst的區別:
1、TBST的pH值隨溫度變化大壹點,而PBST似乎容易有沈澱,若稀釋抗體後需要反復使用的話建議使用TBST溶解。
2、兩種洗液用起來沒有什麽區別,都是提供壹個緩沖的PH值環境,加上吐溫20有助於蛋白的洗脫。PBST的磷酸鹽緩沖液加Tween-20,而TBST是Tris緩沖液加Tween-20。
PBS溶液是指磷酸緩沖液(Phosphate Buffer Solution),滲透壓近似於生理條件又有很強的pH緩沖能力,常用來洗細胞(不易漲裂)和作為細胞培養的基礎液(pH緩沖)。
TBS緩沖液是生物學中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用於免疫組化和原位雜交,酶聯免疫等實驗中,清洗免疫印跡實驗中非特異性結合的抗體等。由 Tris-HCl 構成穩定的 PH 緩沖體系,NaCl 提供等滲條件.
TBST的配置
先稱量NaCl40g,倒入燒杯中;
加DDW蒸餾水400ml,再稱量NaCl?47.6g;倒入剛才的那個燒杯中(PS:由於NaCl的量太多,壹次稱量不方便,所以分兩次稱量,且易於溶解);
往燒杯中加入Tris—HCl緩沖液100ml;
最後加(吐溫20)5ml;
轉入1000ml容量瓶中,在定容,轉移即可。