LC-MS如何提高覆蓋率?LC-MS數據經軟件分析後與數據庫中的相應蛋白覆蓋率在20%以下,這正常麽?如何提高
快速發展後,1970年,質譜 - 質譜法(的質量separetion質譜表征)。這種方法允許,母離子進壹步開裂,導致在裂化過程和分子結構,通常被稱為串聯質譜,二維質譜,和順序質譜。
我們知道,質譜分析的物質的基礎上,建立的電離達到的目的的分析,根據與強度的荷質比分離離子通過測量離子峰。所形成的離子通過汽化的樣品經色譜分離後的電場和磁場的綜合作用下電離,根據質量數的大小和數量的順序排列的光譜被記錄的費用的比率。常見的MS縱軸離子信號強度,橫軸是核質比的離子。中通常使用的液體色譜質譜ESI和APCI離子源中,我們使用的是ESI。 ESI是比APCI軟的電離的電離程度小,APCI大的應用範圍,只有壹小部分可以不使有機分子ESI,APCI輔助解決問題。壹般使用ESI和APCI更廣泛的應用範圍比ESI和APCI。
ESI和APCI通常會產生(M + H)+或(MH) - 分子離子源參數調整簡單,使用方便,靈敏度高的儀器。 APCI源,不足之處是有限的結構信息,樣品易發生熱裂解,低質量的基線噪音。 ESI通常只的分子離子峰,和它們的混合物,可以直接測量極性化合物是熱不穩定的,並可以被測量。它易於形成的生物大分子,如蛋白質和DNA的多電荷離子的特性,可以進行分析的壹部分,得到的化合物的結構,通過調整控制離子碎片離子源電壓(源內CID) 。
當然了,有機質譜也有其自身的局限性。大多數的有機分子的異構體,和質譜在立體化學方面的辨別能力;色譜重復性需要嚴格控制經營狀況略差,不能直接NMR,IR等手中,並要求負責人;質譜離子源的記憶效應,操作是非常復雜的,然而,氣相色譜 - 質譜法在天然產物的分析[1],藥物代謝,結合確定的對象(如苯丙酮尿癥PKU)[2],藥物合成監測(萊克多巴胺)[ 3]有著重要的應用。耶魯大學教授J.Fenn和其他ESI-MS首次出版於1984年的研究,並於1988年成功地進行了蛋白質的分析。
先天性的疾病中有很大壹部分的先天性代謝性疾病,多百種醫學的進步已經知道了。這些疾病,而不是致命的,但兒童的智力和身體可能會導致老年癡呆癥,不完整和畸形的家庭帶來沈重的負擔,社會和國家。目前,有30余種代謝性疾病,遺傳性疾病,如氨基酸代謝障礙包括同構的高胱氨酸尿癥瓜氨酸酪氨酸,超苯丙氨酸血癥精氨酸酶缺乏癥,精氨琥珀酸尿癥和各種超蛋氨酸血癥高脂血癥,短鏈長鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥(SCAD和LCAD),異高脂血癥,甲基丙二酸血癥丙酸血癥,戊二酸血癥,以及各種其他有機酸代謝障礙性疾病,因此可以采用LC / MS / MS的臨床檢測[4 。
我們知道,確保藥品雜質的質量控制檢查和限制,使用LC / MS / MS可以很容易地藥物監測的壹個重要方面。薩科建立不同批次的抗癌藥物DuP941的LC / MS / MS圖譜質量控制的目的; Rourick,建立藥品雜質,降解產品采用LC / MS / MS功能鑒定頭孢菌素頭孢羥氨芐結構鑒定方法。使用LC / MS / MS分析的化學家是壹個挑戰在體內藥物分析中也顯示了極大的優越性。金城武壹直使用固相微萃取和液相色譜分離MS / MS檢測的血液和尿液中的11個增值吩噻嗪類藥物進行了分析。黃進行微透析-LC/MS/MS,生物體內微透析探針插入頸內動脈的動物,實時了解褪黑激素在人體內的生化過程,代謝。 LC / MS / MS也能識別很多藥,體液中,據報道,在許多文獻[5,6]。的
LC / MS / MS分析也用於測定分子量在生物技術[7]。對於精確的質量測定的蛋白質的分子量為10,000或更多離子噴塗技術是常規分析。研究離子噴霧測定甲硫酸 - 人類生長激素(MET-HGH)的分子量至22,256.32±0.44Dr與實際22,256.2博士差異計算的分子量是小。聚丙烯酰胺凝膠電泳,蔗糖密度梯度離心等經典蛋白質分子量的測定比分析時間短,樣品消耗少,快速,準確的測定。有研究人員使用LC / MS / MS進行分析的DNA藥物結合蛋白和金屬離子配位[8]。
司法鑒定LC / MS / MS是壹個強大的工具,也是壹種藥物檢測[9]。 Soenoff血的新生嬰兒的,的苯甲酰Aikangning確鑿的證據,以確定出生的嬰兒,對涉嫌吸毒者。 clauwean頭發可卡因和其代謝產物通過LC / MS / MS和LC /熒光檢測,得到的結果是壹致的,並仍然可以被進行,在非常低的濃度,在MS / MS掃描。王可卡因及其代謝物的的CID來源和標準的深刻巨大的成功的條件的變化開裂機理。
LC / MS / MS在食品檢測是不可低估的。例如氯黴素蜂蜜中的LC / MS / MS分析,孔雀石綠在魚LC / MS / MS,LC / MS / MS分析的各種抗生素,動物組織,19β-腎上腺素興奮劑檢測蘇丹LC-MS/MS方法決心,水果和蔬菜,同時檢測100種農藥及其代謝產物,油炸食品中丙烯酰胺的測定。動物源性食品中硝基呋喃國際貿易的必檢項目硝基呋喃類藥物呋喃唑酮,呋喃酮,呋喃西林,呋喃妥因大腸桿菌和沙門氏菌腸胃疾病的治療和預防的哺乳動物。研究發現,呋喃西林,呋喃唑酮及其代謝產物有致癌作用[10]。
1995年,歐盟禁止在食用動物中使用硝基呋喃類藥物,2002年,中國頒布了壹項禁令,禁止類獸藥的使用[11]。硝基呋喃類藥物代謝快和對光敏感的,但在動物體的母體化合物,和產品的迅速下降到低於檢測極限,但其代謝產物的蛋白質結合物可能會在很長壹段時間的形式[12留在體內, 13]。
國家硝基呋喃代謝物的指示硝基呋喃類藥物殘留的標記。彭濤高效液相色譜/串聯質譜法(LC / MS / MS)測定奶粉呋喃唑酮,呋喃酮,呋喃西林,呋喃妥因代謝物的方法。寬實證研究[14,15]。
要求定性和定量隨著科學和技術的發展,日益增長的需求分析現場儀表,制藥行業的雜質含量為0.1%,增加選擇性和靈敏度的檢測更多的化合物,提高了分析的基礎上,復合類型,也是壹個挑戰,我們的分析師。 HPLC / MS / MS與LC強大的分離分析能力和敏感MS鑒定和結構鑒定提供可靠,準確的分子量和結構信息,以簡化測試程序,樣品制備時間和節省時間分析的能力,作為壹個最重要的分離和鑒定方法,在分析化學領域發揮更重要的作用