木黴幾丁質酶的分類和理化性質
木黴幾丁質酶的定義為所有能通過水解N-乙酰葡糖胺的1，4-β-鍵分解幾丁質或幾丁寡糖的酶。根據其酶切方式及最終產物的不同，木黴幾丁質酶可分為3類（Dahiya et al.，2006；劉霞等，2008）：
（1）內切幾丁質酶（EC3.2.1.14），可隨意裂解幾丁質和幾丁寡聚物並釋放可溶性低分子量混合物（GlcNAc）2。
（2）殼二糖酶，可從非還原端裂解幾丁質和幾丁質寡聚物［（GlcNAc）n］，釋放的最終產物主要是（GlcNAc）2。
（3）β-N-乙酰氨基己糖苷酶葡糖胺酶（EC 3.2.1.52），可從非還原端裂解幾丁質和幾丁質寡聚物，釋放N-乙酰葡萄糖胺單體（GlcNAc），而且只有這壹種酶可以水解（Glc-NAc）2。該酶對糖苷配基的耐受力較強，可以利用生色底物來檢測其酶活性。研究還發現β-N-乙酰氨基葡糖苷酶能夠催化轉糖基反應，因此在聚合物化學中可以用來合成區域或者立體選擇性聚合物。除了外切的β-N-乙酰氨基葡糖苷酶外，也有內切的β-N-乙酰氨基葡糖苷酶（EC 3.2.1.96），它催化高含量甘露糖的糖肽和含有［Man（GlcNAc）2］Asn結構的糖蛋白中N，N’-diacetylchitobiosyl單元的水解，其中壹個GlcNAc殘基保留在蛋白上，其余的多糖鏈完整釋放。
表10.8中概括了目前木黴中研究較多的幾種幾丁質酶。木黴幾丁質酶多為內切酶，其分子量為20～190kDa，這些酶的分子量已經通過SDS-PAGE進行了測定，從分子量的差異可以看出木黴幾丁質酶具有多樣性。42kDa的內切幾丁質酶是提純次數最多的壹類酶，其次是70～73kDa的N-乙酰-β-D-葡糖胺酶。木黴以真菌細胞壁作為碳源時，細胞濾液中壹般含有這兩種幾丁質酶。另外，還有人純化了37kDa和33kDa的內切幾丁質酶，40kDa殼二糖酶及28kDa 外切幾丁質酶，還有人通過熒光染色鑒定了其他的酶，例如102kDa的N-乙酰-β-D-葡糖胺酶。
表10.8 木黴中已純化的幾丁質酶
β-1，4-N-乙酰葡糖胺酶適宜pH值為3.0～7.0，最適pH值為5.5；內切幾丁質酶的適宜pH值為4.0～7.0，最適pH值為4.5。β-1，4-N-乙酰葡糖胺酶的最適溫度為50℃，內切幾丁質酶最適溫度為40℃。此外某些木黴幾丁質酶還具有抗熱性（劉霞等，2008）。乙酰葡糖胺酶 CHIT102及內切幾丁質酶 CHIT52，CHIT33 在100℃，3min或55℃，15min的條件下仍能保持酶活性。木黴幾丁質酶不需要輔助因子，因此壹般受金屬離子的抑制作用不明顯，但Zn2+對內切幾丁質酶有抑制作用，並且對某些蛋白酶（主要是胞外酸性蛋白酶例如天冬酰胺蛋白酶）敏感。木黴幾丁質酶還具有糖基化作用（N-glucosylation），這可能與其穩定性有關（Lorito et al.，1998）。