矽膠柱層析的操作技術
矽膠柱層析的原理
利用吸附原理，即利用矽膠對中藥混合物中各種成分吸附能力的差異，而使混合物中各成分得以分離的色譜方法。
矽膠柱層析的操作方法及註意事項 ：
裝柱
操作要點：裝柱前柱底要墊壹層脫脂棉以防吸附劑外漏。 有幹法裝柱和濕法裝柱兩種方法（1）幹法裝柱：將矽膠通過漏鬥裝入柱內，中間不應間斷，形成壹細流慢慢加入管內。也可用橡皮槌輕輕敲打柱矽膠柱使矽膠裝填連續均勻、緊密。柱裝好後，打開下端活塞，然後倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內空氣，並保持壹定液面。
（2）濕法裝柱：將最初準備使用的洗脫劑裝入柱內，打開下端活塞，使洗脫劑緩慢流出。然後把矽膠慢慢連續不斷地倒入柱內（或將矽膠與適量洗脫劑調成混懸液慢慢加入柱內，），矽膠依靠重力和洗脫劑的帶動，在柱內自由沈降，此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內保持壹定的液面，直至把矽膠加完並在柱內沈降不再變動為止。然後在矽膠上面加壹小片濾紙或少許脫脂棉。根據加樣量控制洗脫劑液面至壹定高度。
（3）勻漿法： 攪成勻漿。加入幹矽膠體積壹倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話，必須預先用無水硫酸鈉久置幹燥。氯仿用無水氯化鈣幹燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過柱。
上樣
將欲分離的樣品溶於少量裝柱時用的洗脫劑中，制成體積小、濃度高的樣品溶液，加入層析柱中矽膠面上。如樣品不溶於裝柱時用的洗脫劑，則將樣品溶於易揮發的溶劑中，並加入適量矽膠（不超過柱中矽膠全量的1/10）與其拌勻，除盡溶劑，將拌有樣品的矽膠均勻加到柱頂（始終保持洗脫劑有壹定的液面），再覆蓋壹層矽膠即可。
上樣時註意沿著柱內壁慢慢加入，始終保持矽膠上端表面平整；上樣量為矽膠的1/60~1/30。
洗脫
洗脫劑的選用可通過薄層色譜篩選，壹般TLC展開時Rf 值為0.2~0.3的溶劑系統是最佳的洗脫系統，采用梯度洗脫法洗脫。
先打開柱下端活塞，保持洗脫劑流速1~2滴/秒。上端不斷添加洗脫劑（可用分液漏鬥控制添加速度與下端流出速度相近）。如單壹溶劑洗脫效果不好，可用混合溶劑洗（壹般不超過三種溶劑），通常采用梯度洗脫。洗脫劑的洗脫能力由弱到強逐步遞增。
收集處理
等份收集洗脫液，每份收集量大概與所用矽膠的量相當。每份洗脫液采用薄層定性檢查，合並含相同成分的洗脫液。經濃縮、重結晶處理往往可得到某壹單體成分。如仍為幾個單體成分的混合物，不易析出單體成分的結晶。則需要進壹步層析或用其他方法分離。 ?
註：
(1)柱色譜分離能力比薄層分離能力強，效果更好，尤其對結構相似、性質接近、采用薄層難以分離的成分分離效果好。
(2) 洗柱子能不用含水的混合溶劑，就盡量不要用。