求助QIAGEN試劑盒提取總RNA的步驟
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樣品處理:
a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
c. 貼壁細胞:直接在培養板中加入裂解液裂解細胞,每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
d. 細胞懸液:離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。
e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液,混勻後室溫放置10分鐘,10000rpm離心1分鐘。棄上清,若沈澱含有紅細胞,可加入2倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心後沈澱加入1 ml裂解液混勻。