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求文檔: 實驗室槍的使用

在進行分析測試方面的研究時,壹般采用移液槍(pipette)量取少量或微量的液體。對於移液槍的正確使用方法及其壹些細節操作,是很多人都會忽略的。現在分幾個方面詳細敘述。

量程的調節

在調節量程時,如果要從大體積調為小體積,則按照正常的調節方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。

在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。

槍頭(吸液嘴)的裝配

在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這時錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的第壹道對準第壹個槍頭,然後傾斜地插入,往前後方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標誌是略為超過O型環,並可以看到連接部分形成清晰的密封圈。

移液的方法

移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處於相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態,將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。

壹是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第壹停點,然後慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第壹停點排出液體,稍停片刻繼續按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最後松開按鈕。

二是反向移液法。此法壹般用於轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多於設置量程的液體,轉移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第壹停點排出設置好量程的液體,繼續保持按住按鈕位於第壹停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。

移液器的正確放置

使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭裏有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。

維護保養時的註意事項

如不使用,要把移液槍的量程調至最大值的刻度,使彈簧處於松弛狀態以保護彈簧。

最好定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾幹。

高溫消毒之前,要確保移液器能適應高溫。

校準是可以在20-25度環境中,通過重復幾次秤量蒸餾水的方法來進行。

使用時要檢查是否有漏液現象。方法時吸取液體後懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。

如果漏液,原因大致有壹下幾方面:

1、槍頭是否匹配;

2、彈簧活塞是否正常;

3、如果是易揮發的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題。可以先吸放幾次液體,然後再移液。

可調式自動取液器的操作方法:

用拇指和食指旋轉取液器上部的旋鈕,使數字窗口出現所需容量體積的數字,在取液器下端插上壹個塑料吸頭,並旋緊以保證氣密,然後四指並攏握住取液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第壹停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,並停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到第壹停點,停留壹秒鐘(粘性大的液體要加長停留時間),再按壓到第二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便於用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸

移液器使用註意事項

(1)吸取液體時壹定要緩慢平穩地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。

(2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取壹次樣品溶液,然後再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留壹層”液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。

(3)濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。

(4)可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g.

(5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內部零件松散而損壞移液器。

(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。

所設量程在移液器量程範圍內不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。?數字清清楚楚在顯示窗中,?旋轉到所需量程?(7)在設置量程時,請註意

(8)移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。

(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。

(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程範圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作

移液器的種類和使用

準確的分析方法對於生物化學實驗是極為重要的,在各種生物化學分析技術中,首先要熟練掌握的就是準確的移液技術。為此要用到各種形式的移液管,其中有壹些是學生們在化學實驗中未用過而在生化實驗中是常用的。

1 滴管

使用方便,可用於半定量移液,其移液量為1mL~5mL,常用2mL,可換不同大小的滴頭。滴管有長、短兩種,新出的壹種帶刻度和緩沖泡的滴管,可以比普通滴管更準確地移液,並防止液體吸入滴頭。

2 移液管(吸管)

吸管使用前應洗至內壁不掛水珠,1mL 以上的吸管用吸管專用刷刷洗,0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗滌劑浸泡,必要時可以用超聲清洗器清洗。由於鉻酸洗液致癌,應盡量避免使用。若有大量成批的吸管洗後沖洗,可使用沖洗桶,將吸管尖端向上置於桶內,用自來水多次沖洗後再用蒸餾水或無離子水沖洗。

吸管分為兩種,壹種是無分度的,稱為大肚吸管,精確度較高,其相對誤差A 級為0.7%~0.8%,B 級為1.5%~0.16%,液體自標線流至口端(留有殘液),A 級等待15s,B 級等待3s。另壹種吸管為分度吸管,管身為壹粗細均勻的玻璃管,上面均勻刻有表示容積的分度線,其準確度低於胖肚吸管,相對誤差A 級為0.8%~0.2%,B 級為1.6%~0.4%,A 級、B 級在吸管身上有A、B 字樣,有”快”字則為快流式,有”吹”字則為吹出式,無”吹”字的吸管不可將管尖的殘留液吹出。吸、放溶液前要用吸水紙擦拭管尖。

3 微量進樣器

微量進樣器常用作氣相和液相色譜儀的進樣器,在生化實驗中主要是用作電泳實驗的加樣器,通

常可分為無存液和有存液兩種。

(1)10μL 以下的極微量液體進樣。

無存液微量進樣器:進樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處,不會出現存液。

(2)10μL~100μL 有存液微量進樣器:不銹鋼的針尖管部分是空管,進樣器的柱塞不能到達,因而管內會存有空氣或液體,其使用註意事項是:①不可吸取濃堿溶液,以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件;②因為有存液,所以吸液時要來回多拉幾次,將針尖管內的氣泡全部排盡;③針尖管內孔極小,使用後尤其是吸取過蛋白質溶液後,必須立即清洗針尖管,防止堵塞。若遇針尖管堵塞,不可用火燒,只能用φ0.1mm 的不銹鋼絲耐心串通;④進樣器未潤濕時不可來回幹拉芯子,以免磨損而漏氣;⑤若進樣器內發黑,有不銹鋼氧化物,可用芯子蘸少量肥皂水,來回拉幾次即可除之。

4 自動取液器

這種取液器在生化實驗中大量地使用,它們主要用於多次重復的快速定量移液,可以只用壹只手操作,十分方便。移液的準確度(即容量誤差)為±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重復性誤差)更小些,為≤0.5%。

取液器可分為二種:壹種是固定容量的,常用的有100μ L 等多種規格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭,吸頭通常是壹次性使用,當然也可以超聲清洗後重復使用,而且此種吸頭還可以進行120℃高壓滅菌;另壹種是可調容量的取液器,常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等幾種。

可調式自動取液器的操作方法是用拇指和食指旋轉取液器上部的旋鈕,使數字窗口出現所需容量體積的數字,在取液器下端插上壹個塑料吸頭,並旋緊以保證氣密,然後四指並攏握住取液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第壹停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,並停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到第壹停點,停留壹秒鐘(粘性大的液體要加長停留時間),再按壓到第二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便於用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。

自動取液器的使用註意事項是:

①吸取液體時壹定要緩慢平穩地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。

②為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取壹次樣品溶液,然後再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留壹層”液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。

③濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。

④可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。