磷鉬藍萃取光度法
方法提要
在酸性介質中，活性磷酸鹽與鉬酸銨反應生成磷鉬黃，以抗壞血酸還原為磷鉬藍，用醇類有機溶劑萃取，於波長700nm處測量吸光度。
本法適用於測定海水中的活性磷酸鹽。檢出限為0.2μg/L。
儀器
分光光度計。
試劑
硫酸(1+2)在攪拌下將300mLH2SO4緩緩加到600mL水中。
正己醇。
無水乙醇。
鉬酸銨溶液(140g/L)溶解28g鉬酸銨［(NH4)6Mo7O24·4H2O］於200mL水中。溶液變渾濁時，應重配。
酒石酸銻鉀溶液(30g/L)溶解6g酒石酸銻鉀 於200mL.水中，貯存於聚乙烯瓶。溶液變渾濁時，應重配。
混合溶液攪拌下將45mL鉬酸銨溶液加到200mLH2SO4中，加入5mL酒石酸銻鉀溶液，貯存於棕色玻璃瓶中。溶液變渾濁時，應重配。
抗壞血酸溶液(100g/L)溶解20g抗壞血酸於200mL水中，貯存於棕色試劑瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可穩定壹個月。
磷酸鹽標準儲備溶液ρ(P)=0.300mg/mL稱取1.318g磷酸二氫鉀(KH2PO4，優級純，在110～115℃烘1～2h)溶於10mLH2SO4中，全量轉入1000mL容量瓶，加水至標線，混勻，加1mL三氯甲烷。
磷酸鹽標準溶液ρ(P)=3.00μg/mL移取1.00mL磷酸鹽標準儲備溶液於100mL容量瓶中，加水至標線，混勻，加兩滴三氯甲烷。有效期為壹周。
校準曲線
取5個500mL錐形分液漏鬥，加入250mL水，分別移入0mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL磷酸鹽標準溶液。系列磷濃度為0μg/L、3.00μg/L、6.00μg/L、12.0μg/L、24.0μg/L。
加5mL混合溶液、5mL抗壞血酸溶液混勻，放置10min。加入25.0mL正己醇，振蕩2min，靜置10min，棄去水相，把有機相放入25mL具塞量筒中，加1.0mL無水乙醇，混勻，放置5min。將萃取液註入5cm比色皿中，以正己醇作參比，於波長700nm處測量吸光度Ai。其中A0為零濃度的標準空白吸光度。
以吸光度(Ai-A0)為縱坐標，相應的磷酸鹽濃度(μg/L)為橫坐標，繪制校準曲線。
分析步驟
量取250mL經0.45μm濾膜過濾的水樣於500mL錐形分液漏鬥中，按上述繪制校準曲線步驟測定水樣吸光度Aw。
同時量取250mL水於500mL錐形分液漏鬥中，測定分析空白吸光度Ab。
據(Aw-Ab)值在校準曲線上查得水樣中活性磷酸鹽質量濃度(μg/L，P)。
註意事項
1)硫化物含量大於1mg/L(S)時，對本方法有明顯的影響。此時，水樣酸化後，通氮氣10min，可明顯除去硫化物幹擾。
2)砷酸鹽含量大於0.5mg/L(As)時，對本方法有明顯的影響。通常海水中砷含量(As)約0.003mg/L，其影響可忽略不計。
3)矽酸鹽含量大於1.4mg/L(Si)時，對本方法有影響。河口水和大洋深層水中矽酸鹽含量常大於1.4mg/L(Si)，應進行校正。首先由下式，求出矽酸鹽增加的吸光度ASi:
巖石礦物分析第四分冊資源與環境調查分析技術
式中:FSi為用本方法測定矽酸鹽校準曲線的斜率;ρSi為水樣中矽酸鹽質量濃度(Si)，mg/L。
據(Aw-Ab-ASi)值在測定活性磷酸鹽的校準曲線上查得其濃度。