醋酸薄膜 電泳儀的操作步驟是怎樣的
1,醋酸纖維薄膜的準備,將醋酸纖維薄膜切成10cm*2.5cm的膜條,用鑷子夾住緩慢放入巴比妥緩沖液中30分鐘,充分浸透,取出用濾紙吸去多余的緩沖液。
2,點樣,用微量吸管將5ug,但白字樣品點在薄膜中英。
3,電泳儀濕潤的薄膜條置於電泳儀的長條架子上,薄膜條兩端與濾紙相接觸,拉直膜條,將濾紙條的另壹端浸入緩沖液中,緩沖液兩槽的液面要水平,以避免虹吸現象。加蓋密封,註意防止緩沖液蒸發並避免水滴落在膜條上。靜止10分鐘。接通電源開始電泳,調節好電壓使之穩定,以
20mv/cm的電場強度電泳1小時左右。
4,顯色,電泳完畢後,取出膜條,用溴酚藍顯色法或者氨黑10B顯色法處理,取出膜條後浸入氨基黑染液中染色5~10分鐘,然後用漂洗液洗5分鐘,直到區帶清晰為止。 若要保存圖譜或使用分光光度計直接測定,則可在膜條染色後,洗褪底色,完全幹燥後,置於透明液中5分鐘,取出,幹後即可。