蛋白質組學研究的主要步驟
蛋白質組學研究的主要步驟如下:
1、蛋白質樣品的制備:蛋白質樣品的制備是蛋白質組學研究的首要環節,也是最為重要的部分。蛋白質樣品的質量直接影響到科學研究的真實性和可信度。
2、蛋白質的分離:雙向凝膠電泳技術是目前最基礎和常用的蛋白質分離方法,它能將數千種蛋白質同時分離與展示的分離技術。雙向電泳分為等電聚焦電泳和SDS-PAGE兩個步驟,即先進行等電聚焦電泳,按照pI的不同將蛋白分離,然後再進行SDS-PAGE 按照分子量的大小不同對蛋白進行分離。
3、蛋白質雙向電泳凝膠的染色。目前雙向電泳凝膠的染色的方法有3種,分別為考馬斯亮藍染色法、銀染法和熒光染色法。考馬斯亮藍染色法,操作簡便,無毒性,染色後的背景及對比度良好。
4、雙向電泳凝膠圖像的采集與分析:圖像采集系統通過投射掃描根據吸光度的大小獲礙蛋白質點的光密度信息。壹般來說,該光密度值與蛋白質點的表達豐度成正比,以便於軟件分析時的定量比較。完成圖像采集後采用Image Master等圖像分析軟件進行分析。
蛋白質的用處:
1、蛋白質是建造和修復身體的重要原料,人體的發育以及受損細胞的修復和更新,都離不開蛋白質。
2、蛋白質也能被分解為人體的生命活動提供能量。