常用化學實驗試劑的配制與應用有哪些?
壹、通用試劑
1、碘試劑
檢查壹般有機化合物。
(1)碘蒸氣 預先將盛有碘結晶的小杯置於密閉的玻璃容器內,使容器空間被碘蒸氣飽和,將薄層置於容器內數分鐘即顯棕色斑點。有時,於容器中加放壹小杯水,增加容器內的濕度,可提高顯色的靈敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液 噴灑試劑,置空氣中待過量的碘揮發後,噴1%澱粉溶液,斑點由棕色轉為藍色。
2、硫酸試劑
查壹般有機化合物。
5%硫酸乙醇溶液作為色譜顯色劑用。噴灑後,置空氣中幹燥15min,100℃烤至斑點呈色(不同化合物呈不同顏色)。
3、重鉻酸鉀—硫酸試劑
檢查壹般有機化合物。
5g重鉻酸鉀溶於l00ml40%硫酸中。噴該試劑後,150℃加熱至斑點出現(不同化合物呈不同顏色)。
4、磷鉬酸試劑
檢查還原性成分。
5%磷鉬酸乙醇溶液。噴灑後,120℃加熱至呈藍色斑點。
5、磷鎢酸試劑
檢查還原性成分
20%磷鎢酸乙醇溶液。噴灑後,120℃烘烤,還原性物質呈藍色斑點。
6、硝酸銀—氫氧化銨試劑
檢查還原性成分。
溶液I:0.1mol/L硝酸銀溶液。溶液Ⅱ:10%氫氧化銨溶液。臨用前溶液I和Ⅱ以
1︰5混合。噴灑後105℃加熱5~l0min,至深黑色斑點出現。
7、中性高錳酸鉀試劑
檢查易還原性成分。
0.05%高錳酸鉀溶液。噴灑後粉紅色背景上顯黃色斑點。
8、堿性高錳酸鉀試劑
檢查還原性成分。
溶液I:1%高錳酸鉀溶液。溶液Ⅱ:5%碳酸鈉溶液。溶液I和Ⅱ等量混合使用,噴灑後,粉紅背景上顯黃色斑點。
9、四唑藍試劑
檢查還原性成分。
溶液I:0.5%四唑藍甲醇溶液。溶液Ⅱ:25%氫氧化鈉溶液。臨用前兩液等量混合。噴灑後,微熱或室溫放置顯紫色斑點。
10、熒光素—溴試劑
檢查不飽和化合物。
溶液I:0.1g熒光素溶於l00ml乙醇中。溶液Ⅱ:5g溴溶於l00ml四氯化碳中。先噴灑溶液I,然後將薄層板放入盛有溶液Ⅱ的缸內,黃色斑點出現後,於紫外光燈下檢視,紅色底板上顯黃色熒光斑點。更多質量檢測、分析測試、化學計量、標準物質相關技術資料請參考中檢所標準品對照品 www.rmhot.com
11.熒光顯色試劑
檢查壹般有機化合物。
(1)0.2%2,7--'氯熒光素乙醇溶液。
(2)0.01%熒光素乙醇溶液。
(3)0.1%桑色素乙醇溶液。
(4)0.05%羅丹明B乙醇溶液。
噴灑任壹溶液,不同的化合物在熒光背景上可顯黑色或其它熒光斑點。
二、苷類鑒定試劑
1、糖鑒定試劑
(1) -萘酚-硫酸試劑
檢查還原糖。
①溶液I:10% —萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ:硫酸。取lml樣品的稀乙醇溶液或水溶液,加入溶液I 2~3滴,混勻,沿試管壁緩緩加入少量溶液Ⅱ,二液面交界處產生紫紅色環為陽性反應。
②15% —萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混勻後使用。噴灑於薄層板上,100℃烤3~6min,多數糖顯藍色,鼠李糖顯橙色,所顯顏色於室溫可穩定2天~3天。
(2)斐林試劑
檢查還原糖。 ‘
溶液I:6.93g結晶硫酸銅溶於l00ml水中。溶液Ⅱ:34.6g酒石酸鉀鈉、10g氫氧化鈉溶於l00ml水中。取lml樣品熱水提取液,加入4~5滴用時配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液,在沸水浴中加熱數分鐘,產生磚紅色沈澱為陽性反應。如檢查多糖和甙,取lml樣品水提液,加入lmll0%鹽酸溶液,在沸水浴上加熱l0min,過濾,再用10%氫氧化鈉溶液調至中性,按上述方法檢查還原糖。
(3)氨性硝酸銀試劑
檢查還原糖。
硝酸銀1g,加水20ml溶解,小心滴加適量氨水,邊加邊攪拌,至開始產生的沈澱將近全部溶解為止,過濾。取lml樣品的水溶液,加入lml試劑,混勻後,40℃微熱數分鐘,管壁析出銀鏡或產生黑色沈澱為陽性反應。本試劑也可作為色譜顯色劑,噴灑後於110℃加熱數分鐘,顯棕黑色斑點為陽性反應。還原性物質如醛類、鄰二酚類等有幹擾。
(4)茴香醛-硫酸試劑
檢查糖類化合物。
硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中,需臨用前配制。噴灑於薄層板上,105℃加熱至顯示色斑,不同糖顯不同顏色。
(5)苯胺-鄰苯二甲酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺0.93g和鄰苯二甲酸1.66g溶於100ml水飽和的正丁醇中。作色譜顯色劑用。噴後105℃烤5min,顯紅棕色斑點。
(6)l,3-二'羥基萘酚-磷酸試劑
檢查酮糖、醛糖。
0.2%1,3--'二羥基萘酚乙醇溶液50ml與85%磷酸50ml混合均勻後使用。噴後105℃烤5min~10min,酮糖呈紅色,醛糖顯淡藍色。
(7)苯胺-二苯胺-磷酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺4ml、二苯胺4g及85%磷酸20ml溶於丙酮200ml中。噴灑於薄層板上,85℃加熱10min,不同糖顯不同顏色。
(8)2,3,5-三苯基氯化四氮唑(T.T.C)試劑
檢查還原糖。
溶液Ⅰ:4%T.T.C甲醇溶液。溶液Ⅱ:4%氫氧化鈉溶液。臨用時將溶液Ⅰ和Ⅱ等體積混合。噴灑後,100℃加熱5~10min,顯紅色斑點為陽性反應(醛類無幹擾)。
(9)三氯化鐵-冰醋酸(K.K)試劑
檢查 -去氧糖,常用於強心甙。
溶液I:1%三氯化鐵溶液0.5ml,加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ:硫酸。取樣品乙醇提取液lml,置試管中,水浴上蒸去乙醇,殘渣用0.5ml溶液I溶解,沿試管壁緩緩加入溶液Ⅱlml,靜置分層,上層漸顯藍色,下層顯紅色或棕色為陽性反應(其顏色隨苷元羥基和雙鍵的位置和個數不同而不同)。
(10)占噸氫醇試劑
檢查 -去氧糖(常用於強心甙)。
10mg占噸氫醇溶於100ml冰醋酸中,再加入lml硫酸混合。取lml樣品,加入試劑lml,置水浴上加熱30min,顯紅色為陽性反應。
(11)Gregg-Gisvold試劑
檢查2.6-去氧糖。
溶液I:10%三氯化鐵溶液。溶液Ⅱ:1%鹽酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2.8ml鹽酸)。0.5ml溶液I與100ml溶液Ⅱ混合。將樣品的乙醇溶液點於濾紙片上,晾幹後,噴灑上述混合試劑,110℃加熱5min,顯藍色為陽性反應。
(12)3,5-二氨基苯甲酸-磷酸試劑
檢查2-去氧糖。
3,5-二氨基苯甲酸二鹽酸鹽1g溶於80%磷酸25ml,加水稀釋至60ml。噴灑後,100℃加熱15min,2-去氧糖在日光下顯棕色,在紫外光下顯黃綠色熒光。
(13)對硝基苯胺-過碘酸試劑
檢查去氧糖。
溶液I:飽和偏高碘酸溶液1份加水2份混勻。溶液Ⅱ:1%對硝基苯胺乙醇溶液4份與鹽酸1份混合。先噴溶液I,放置10min,再噴溶液Ⅱ,去氧糖顯黃色,紫外光下顯強熒光,再噴5%氫氧化鈉甲醇溶液,顏色轉綠,乙二醇同樣顯色。